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原代細(xì)胞基因編輯效率突破80%!科研人的高效新選擇

更新時(shí)間:2025-04-24

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用戶真實(shí)反饋:科研大咖的“真香"體驗(yàn)

“CD3被敲低了80%多!你們這試劑的確有點(diǎn)東西!我做原代的,每次都得敲,以后我要長期回購!"

原代細(xì)胞基因編輯效率突破80%!科研人的高效新選擇

這條來自一線科研人的反饋,印證了ProteanFect CRISPRMax的硬核實(shí)力。無論是基因敲除、點(diǎn)突變還是大片段插入,這款試劑盒均能穩(wěn)定輸出高效結(jié)果。


今天,我們?yōu)槟鷰硪豢罡锩援a(chǎn)品——ProteanFect CRISPRMax Cas9基因編輯轉(zhuǎn)染試劑盒。它憑借非病毒非電轉(zhuǎn)非脂質(zhì)體的獨(dú)·特技術(shù),輕松實(shí)現(xiàn)原代細(xì)胞80%以上的基因編輯效率,成為國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室的“明星工具"!


產(chǎn)品核心優(yōu)勢:為何選擇ProteanFect CRISPRMax?

1. 專為原代與難轉(zhuǎn)細(xì)胞設(shè)計(jì),效率突破瓶頸

原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率高達(dá)80%+:用戶實(shí)測數(shù)據(jù)顯示,人原代Treg細(xì)胞中CD3基因敲低效率超過80%,與說明書中的流式數(shù)據(jù)(86% CD3陰性率)高度一致。

難轉(zhuǎn)細(xì)胞系的救星:無論是懸浮細(xì)胞還是貼壁細(xì)胞,均能穩(wěn)定遞送Cas9 mRNA和sgRNA,共表達(dá)率超90%。

2. 安全無憂:非病毒、無毒性、零殘留

基于自組裝蛋白納米顆粒技術(shù),無需病毒載體或脂質(zhì)體,避免基因組整合風(fēng)險(xiǎn),顯著降低細(xì)胞毒性。

轉(zhuǎn)染后細(xì)胞活力恢復(fù)快,第二天即可正常培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)周期大幅縮短。

3. 操作極簡,節(jié)省成本

預(yù)混試劑+明確步驟:只需按表配置Reagent A/B/C,孵育后即可完成轉(zhuǎn)染。

無需耗費(fèi)高成本構(gòu)建基因敲除鼠,直接實(shí)現(xiàn)T細(xì)胞穩(wěn)定基因高效敲除。

技術(shù)揭秘:蛋白納米顆粒如何實(shí)現(xiàn)高效遞送?

ProteanFect CRISPRMax的核心在于其自組裝蛋白納米顆粒技術(shù):

高效負(fù)載:帶正電的納米顆粒通過靜電作用吸附Cas9 mRNA和sgRNA,形成穩(wěn)定復(fù)合物。

精準(zhǔn)遞送:復(fù)合物通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞后,迅速釋放核酸,避免溶酶體降解。

安全釋放:無需依賴病毒或脂質(zhì)體的膜融合機(jī)制,減少細(xì)胞損傷。


實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證:

靶向人TRAC基因的sgRNA轉(zhuǎn)染原代T細(xì)胞后,TIDE測序顯示編輯效率達(dá)88.5%,與流式結(jié)果高度吻合。

EGFP mRNA共轉(zhuǎn)染陽性率超90%,輕松監(jiān)控轉(zhuǎn)染效果。

數(shù)據(jù)分享:高效基因編輯,從ProteanFect開始

使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯轉(zhuǎn)染試劑盒轉(zhuǎn)染人原代 T 細(xì)胞,使用試劑盒中的 human TRAC-sgRNA 陽性對(duì)照敲除 TRAC 基因。在轉(zhuǎn)染 72 小時(shí)后,收集細(xì)胞,在蛋白水平(圖 1)和 DNA 水平(圖 2)檢測基因敲除的效率。

原代細(xì)胞基因編輯效率突破80%!科研人的高效新選擇

圖 1. 使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯轉(zhuǎn)染試劑盒編輯人原代 T 細(xì)胞中 TRAC基因后,TCR 蛋白表達(dá)的流式檢測結(jié)果。流式結(jié)果顯示,陽性對(duì)照組中約 86%的 T 細(xì)胞為 CD3陰性,表明該試劑盒同時(shí)遞送 Cas9 mRNA/sgRNA,總細(xì)胞群中約有 86%細(xì)胞的 TRAC 基因被成功編輯。

原代細(xì)胞基因編輯效率突破80%!科研人的高效新選擇

圖 2.使用 ProteanFect CRISPRMax Cas9 基因編輯轉(zhuǎn)染試劑盒編輯人原代 T 細(xì)胞中 TRAC 基因的測序分析結(jié)果。收集轉(zhuǎn)染后的總細(xì)胞提取基因組 DNA,對(duì)靶點(diǎn)位置 PCR 擴(kuò)增(正向引物序列:GCAGTATTATTAAGTAGCCCT,反向引物序列:AACAAGGCTCACTGTTTCTT)并進(jìn)行Sanger 測序,通過 TIDE 對(duì)測序結(jié)果進(jìn)行分析,結(jié)果顯示陽性對(duì)照組中靶點(diǎn)基因被編輯的比例約為 88.5%,與流式檢測蛋白水平的敲除結(jié)果(CD3-TCR 流式陰性比例)相當(dāng)。


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